Page 110 - เอกสารประกอบการประชุมวิชาการกรมพัฒนาที่ดิน ปี2560 วิชาการงานพัฒนาที่ดิน ขับเคลื่อนคุณภาพชีวิตเกษตรกรสู่ความยั่งยืน : ระหว่างวันที่ 19-21 กรกฎาคม 2560 ณ โรงแรมสยามออเรียนทัล อำเภอหาดใหญ่ จังหวัดสงขลา

ห้องสมุดกรมพัฒนาที่ดิน

ประชุมวิชาการกรมพัฒนาที่ดิน ปี 2560 “วิชาการงานพัฒนาที่ดิน ขับเคลื่อนคุณภาพชีวิตเกษตรกรสู่ความยั่งยืน” วันที่ 19 - 21 กรกฎาคม 2560

ภาพที่ 1 ที่มา ; Blumenstein, 2015

ถ้าค่า spherical index = 1 โคโลนีของเชื้อราเป็นรูปวงกลม

spherical index > 1 โคโลนีของเชื้อราเจริญเติบโตมากทางด้านแกน b
spherical index < 1 โคโลนีของเชื้อราเจริญเติบโตมากทางด้านแกน a

3.4 วิเคราะห์ค่า % การยับยั้ง หรือ % PIRG (Percent Inhibition of Radial Growth) (Thanh et

al., 2014) จากสมการ
% PIRG = (R1 - R2) * 100

R1

เมื่อ R1 = เส้นผ่าศูนย์กลางแกน a ของเชื้อราโรคพืชที่เพาะเลี้ยงเดี่ยว (ภาพที่ 1)
R2 = เส้นผ่าศูนย์กลางแกน a ของเชื้อราโรคพืชที่เพาะเลี้ยงคู่กับเชื้อราเอนโดไฟต์ (dual culture) โดยที่

% PIRG ≤ 50% มีค่า % การยับยั้งต่ า (+)
50% < % PIRG ≤ 60% มีค่า%การยับยั้งปานกลาง (++)

60% < % PIRG ≤ 75% มีค่า%การยับยั้งสูง (+++)

%PIRG > 75% มีค่า%การยับยั้งสูงมาก (++++)
4. จ าแนกระดับ Genus และจ าแนกระดับ species

จากวิธีการทดลองข้อ 2 และ 3 เลือกเชื้อราที่มีคุณสมบัติเป็นเอนโดไฟต์ สามารถเคลื่อนย้ายเข้าสู่เซลล์

รากข้าวได้ และมีคุณสมบัติเป็น antagonist มา 2 ไอโซเลต เพื่อจ าแนก Genus และ species
4.1 จ าแนกระดับ Genus โดยวิธีทางสัณฐานวิทยา สังเกตลักษณะการเจริญ ลักษณะและโครงสร้าง

ต่างๆ ของเส้นใย และสปอร์ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ (light microscope)

4.2 จ าแนกระดับ species โดยการสกัด DNA และส่งวิเคราะห์ล าดับเบสด้วยวิธี sequencing และ
โปรแกรม Bioinformatics

4.3 เก็บ stock เชื้อในอาหาร PDA slant ที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส และใน glycerol 20
เปอร์เซ็นต์ ที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียส

5. ศึกษาคุณสมบัติความเป็น entomopathogenic fungi ของ endophytic fungi
5.1 ทดสอบการเข้าท าลายแมลงศัตรูข้าว คือ เพลี้ยกระโดดสีน้ าตาล โดยเพาะเลี้ยงเชื้อราเอนโดไฟต์ที่

คัดเลือกได้ และจ าแนก Genus และ species แล้ว 2 ชนิด มาเพาะเลี้ยงบนอาหาร PDA

87