Page 98 - เอกสารประกอบการประชุมวิชาการกรมพัฒนาที่ดิน ปี2560 วิชาการงานพัฒนาที่ดิน ขับเคลื่อนคุณภาพชีวิตเกษตรกรสู่ความยั่งยืน : ระหว่างวันที่ 19-21 กรกฎาคม 2560 ณ โรงแรมสยามออเรียนทัล อำเภอหาดใหญ่ จังหวัดสงขลา

ห้องสมุดกรมพัฒนาที่ดิน

ประชุมวิชาการกรมพัฒนาที่ดิน ปี 2560 “วิชาการงานพัฒนาที่ดิน ขับเคลื่อนคุณภาพชีวิตเกษตรกรสู่ความยั่งยืน” วันที่ 19 - 21 กรกฎาคม 2560

ข้าวจังหวัดตาก จ านวน 4 ไอโซเลต ได้แก่ T4 RT6/1 T6/2 และ T12 จังหวัดก าแพงเพชร จ านวน 2 ไอโซเลต
ได้แก่ KP6/1 และ KP6/2 จังหวัดนครสวรรค์ จ านวน 1 ไอโซเลต คือ NW1 จังหวัดชัยนาท จ านวน 2 ไอโซเลต

ได้แก่ CN4/1 และ CN4/2 และ จังหวัดพระนครศรีอยุธยา จ านวน 1 ไอโซเลต คือ AY16 ซึ่งพบแถบดีเอ็นเอ

ขนาด 263 bp (Fig.1) เมื่อตรวจสอบด้วยไพรเมอร์ที่จ าเพาะกับจีนัสอะโซสไปริลลัมเช่นเดียวกับรายงานของ
Linet al.(2011) โดยผลการจ าแนกชนิดของอะโซสไปริลลัมที่คัดแยกได้ พบว่า มีล าดับเบสคล้ายคลึงกับ

Azospirillum brasilence จ านวน 8 ไอโซเลต ได้แก่ T4 T12 KP6/1 KP6/2 T6/1 NW1 CN4/1 และ
CN4/2 ที่ระดับความเหมือน 100 99 80 80 100 100 99 และ 97 เปอร์เซ็นต์ ตามล าดับ คล้ายคลึงกับ

A. formosence คือ ไอโซเลต T6/1 ที่ระดับความเหมือน 99 เปอร์เซ็นต์ และคล้ายคลึงกับ Azospirillum sp.

คือ ไอโซเลต AY16 ที่ระดับความเหมือน 99 เปอร์เซ็นต์ ซึ่งจะสังเกตได้ว่า A. brasilense จะพบในรากข้าว
มากที่สุด ซึ่งสอดคล้องกับรายงานของ Hartman and Baldani (2006) รายงานว่า สายพันธุ์ของอะโซสไปริลลัม

ที่พบมากอาศัยอยู่ร่วมกับพืชไร่ เช่น ข้าวโพด ข้าวสาลี และข้าว มี 2 สายพันธุ์ ได้แก่ A. brasilense และ

A. lipoferum

Fig.1 Gel electrophoresis of the Azospirillum
specific fragments after PCR amplification;
Lane 1 = Marker 100 bp, Lane 2 = T4, Lane

3 = T12, Lane 4 = KP6/1, Lane 5 = KP6/2,
Lane 6 = T6/1, Lane 7 = T6/2, Lane 8 =
CN4/1, Lane 9 = NW1, Lane10 = CN4/2,

Lane 11 = AY16 andLane 12 = dH O
2
(Negative control).
2. การทดสอบประสิทธิภาพการตรึงไนโตรเจน การผลิตฮอร์โมนออกซิน จิบเบอร์เรลลิน และสารไซเดอโรฟอร์

2.1 กิจกรรมการตรึงไนโตรเจน พบว่า อะโซสไปริลลัมทั้ง 10 ไอโซเลต มีค่าการตรึงไนโตรเจนแตกต่างกัน
โดยไอโซเลต CN4/2 มีค่าการตรึงไนโตรเจนสูงสุด 52.49 µmol C H /l/hr แตกต่างอย่างมีนัยส าคัญยิ่งกับ
2 4
ไอโซเลต T4 T12 T6/1 และ AY16 ซึ่งมีค่าการตรึงไนโตรเจนเท่ากับ 17.83 6.97 29.48 และ 31.51 µmol

C H /flask/hr ตามล าดับ แต่ไม่แตกต่างกับไอโซเลต KP6/1 KP6/2 T6/2 CN4/1 และ NW1 มีค่าการตรึง
2 4
ไนโตรเจนเท่ากับ 49.02 43.17 43.89 47.40 และ 36.91 µmol C H /flask/hr ตามล าดับ (Table 1) เมื่อ
2 4
ตรวจสอบยีน NifH พบแถบดีเอ็นเอขนาด 360 bp ทั้ง 10 ไอโซเลต (Fig. 2)

2.2 ประสิทธิภาพการผลิตฮอร์โมนออกซิน (IAA) และจิบเบอร์เรลลิน (GA ) การวิเคราะห์ปริมาณ IAA
3
ของอะโซสไปริลลัมทั้ง 10 ไอโซเลต พบว่า ไอโซเลต AY16 มีประสิทธิภาพการผลิต IAA สูงสุด 47.29 ppm

แตกต่างอย่างมีนัยส าคัญยิ่งทางสถิติ กับไอโซเลตอื่นๆ โดยไอโซเลต T6/2 ผลิตได้สูงรองลงมา มีค่าเท่ากับ
45.26 ppm และไอโซเลต KP6 / 1 ผลิตได้ต่ าสุด 12.28 ppm ส่วนประสิทธิภาพการผลิต GA ของ
3
อะโซสไปริลลัมทั้ง 10 ไอโซเลต พบว่า ไอโซเลต T12 มีประสิทธิภาพการผลิต GA สูงสุด 159.13 ppm
3

75